فحص التطابق Cross-Matching

فحص التطابق Cross-Matching  ...   لابد من اجراء هذه الخطوه قبل الموافقه على اتمام اجراء نقلل الدم للمريض , تاتي هذه الخطوه بعد موافقه فصيله المتبرع لفصيله المريض و استكمال المتبرع لباقي شروط التبرع بالدم مثل قيمه الهيموجلوبين و خلو المتبرع من الامراض التي تنتقل عن طريق الدم الكامل او مكوناته و ضغط الدم و الوزن و العمر .. الخ   ممكن ان نقسم المطابقه الى طريقتين من حيث المبدء ..   1- المطابقه الكبرى Major Cross-Matching : وهي الطريقه الاهم و التي يعمل بها في بنوك الدم و فيها يتم مزج او اختبار سيرم المريض مع خلايا المتبرع المغسوله . يرجع سبب اهميتها الى تمكننا من خلالها معرفه الاجسام المضاده الموجوده في جسم المريض و التي ممكن ان تهاجم كل خلايا المتبرع المنقوله اليه "في حاله نقل الدم الغير متطابق" و بالتالي تكسرها و حدوث جلطات صغيره داخل جسم المريض ممكن ان تؤدي الى الضرر ..   2- المطابقه الصغرى Minor Cross-Matching : و هي الطريقه الثانيه لعمل فحص التطابق و فيها يتم اختبار سيرم المتبرع مع خلايا المريض المغسوله . ترجع قلة اهميتها الى عدم الحاجه الى معرفه الاجسام المضاده التي في جسم المتبرع و التي سوف لن تحدث ضررآ يذكر "في حاله نقل الدم الغير متطابق" في جسم المريض نتيجه لمهاجمتها خلايا دم المريض و ذلك لعامل مهم جدآ وهو التخفيف , تخفيف دم المتبرع داخل جسم المريض سوف يضعف و يشتت قوي تلك الاجسام المضاده و بالتالي سوف لن يحصل ضرر يذكر .   طريقه عمل Major Cross Matching : 1- يتم غسل خلايا المتبرع 3 مرات بأستخدام النورمال سلاين , يتم وضع حوالي 100-200 ميكرون من دم المتبرع في انبوبه زجاجيه و يتم ملئ ثلثي الانبوبه بالنورمال سلاين و توضع في السنترفيوج لمده دقيقه كامله عند 1500 RPM و من ثم يرمى المعلق و يتم اضافه نورمال سلاين مره اخرى و يرسب و يرمى المعلق , تكرر العمليه ثلاثآ . سبب الغسل هنا هو التخلص من جميع مكونات البلازما من بروتينات و معادن و مواد مهضومه و الاهم هو التخلص من جميع الاجسام المضاده في بلازما المتبرع و التي من شأنها التداخل في عمليه التطابق و اعطاء نتائج خاطئه Cross Reaction  .   2- يتم تحضير معلق من خلايا المتبرع المغسوله بتركيز من 5%-10% عن طريق اخد 100 ميكرون من الراسب بعد اخر غسل لخلايا المتبرع و اضافته الى 900 ميكرون سلاين و بهذا نحصل على معل ذو تركيز تابث من خلايا المتبرع المغسوله . سبب تحضير المعلق 10% هو تثبيت عدد الخلايا "الانتيجين" مقابل عدد اللانتي بدي "السيرم" مهما اختلف كميه الدم الداخله في عمليه غسل الخلايا "خطوه رقم 1" , السبب الاخرو الذي لايقل اهيمه عما سبق ذكره هو تفادي حدوث طاهره البروزن "زياده عدد الانتي بدي عن عدد الانتيجين" و البوست زون "زياده عدد الانتيجين عن عدد الانتي بدي" و كلتاهما ان حدتث تعطي نتائج خاطئه False negative .   3- يتم تحضير انبوبتين زجاجيتين و يوضع كميتين متساويتين من سيرم المريض و خلايا المتبرع "بعض مصادر ذكرت كميتين من الخلايا الى كميه من السيرم" و يكتب على احداها 25 اي درجه حراره الغرفه و و تحضن لمده ربع ساعه عند 25 مئويه و تستخدم تلك الانبوبه للكشف عن cold Ab و الذ غالبآ يكون من نوع IgM  , بينما الاخرى يكتب عليها 37 و تحضن في الحمام المائي لمده ربع ساعه و تستخدم للكشف عن Worm Ab و الذي في الغالب يكون من نوع IgG , بعد مرور الربع ساعه يتم اضافه قطره من البوفين البيومين على جدار انبوبه 37 . سبب اضافه البوفين البيومين هو تقليل الزيتا بوتنشيال او الشحنه الكهربيه الموجوده طبيعيآ بين الخلايا الحمر"التي تمنعها من الالتصاق ببعضها داخل الجسم" و بالتالي حدوث تقارب بين الخلايا ليتم الربط بينهم و حدوث تخثر ان كان النقل غير متطابق . و سبب اضافه البوفين البيومين على جدار الانبوبه بالذات هو ان الالبيومين وزنه الجزيئ كبير نسبيآ و باللتالي عند وضع القطره عموديآ لتسقط بشكل مباشر على الخلايا من شأنها ان تسبب حدوث تحلل لبعض الخلايا و ايضآ من شأنها تفكيك بدايه حدوث تخثر "ان وجد"   من ثم قطريتين من الانتي هيومن جلوبيولين AHG في كل انوبه و ترسب الانابيب لمده دقيقه فقط و من ثم تفحض ظاهريآ "بالعين المجرده" للكشف عن وجود ختراث صيره او تحلل كلي او مجهريآ للكشف عن وجود الخثرات . سبب اضافه AHG ليقوم بربط الخلايا ببعضها البعض بشكل اكثر احكامآ و ايضآ ربط الخلايا المتحسسه (اي تلك الخلايا الحمراء التي يوجد على سطحها انتي بدي من نوع IgG و الذي يعتبر انتي بدي غير كامل اي انه لايستطيع احداث تخثر بدون مساعده خارجيه) ان وجدت في انبوبه 37 مئويه .   في حاله عدم وجود تخثر تسجل النتيجه Compatible بمعنى مطابق و يتم نقل الدم . و في حاله وجود تخثر تسجل النتيجه Incompatible بمعنى غير مطابق و لايتم نقل الدم .