اختبار التوافق الدموي(المبدا,الطريقة,الوصف) Croos Matching

 اختبار التوافق الدموي(المبدا,الطريقة,الوصف) Croos Matching

Cross Matching (Compatibility Testing

اختبــــار التوافــــق

• هذا الاختبار يجرى في حالة طلب نقل دم لمريض

• هذا الاختبار يجرى فقط على عينات الدم RBCs ، Packed Cells

• مبدأ الاختبار Principle of the test :

هي وجود توافق بين المريض المستقبل والدم المتبرع به

بحيث أنه لا يوجد أجسام مضادة Antibodies في المريض المستقبل للدم قد تؤدي إلى تفاعلات Reaction خطيرة من خلالها يعامل جسم المريض الدم المنقول له بأنة جسم غريب مما يؤدي إلى مشاكل كثير قد تصل في بعض الأحيان إلى الوفاة .

• يجرى اختبار الكنترول Control لعينة المريض فقط وذلك من أجل تحديد ما إذا كان المريض عنده مشاكل مناعية داخلية مثل بعض الأمراض المناعية أو بسبب كثرة نقل الدم سابقاً أو إصابات ميكروبية سابقة أدت على وجود الأجسام المضادة وغيرها من الأسباب قد تؤدي إلى رفضه للدم المنقول وذلك لسبب مشاكل في جسم المريض المستقبل نفسه وليس لوجود خطأ في توافق العينة من كيس المتبرع أو خطأ آخر من بنك الدم .

طريقة عمل اختبار Cross Matching

طريقة العمل على مرحلتين :

المرحلة الأولى وهي لعمل الـ Cross Matching :

1. يحضر أنبوب واحد One Tube لكل وحدة (كيس) دم Blood Unit مطلوبة حسب حاجة المريض .

2. يضاف إلى الأنبوب قطرتين 2 drops من سيرم المريض Patient Serum

3. يضاف إلى الأنبوب قطرتين 2 drops من دم (كيس) المتبرع Dilution of Cells (blood) of donor

4. تضاف قطرتين 2 drops من Bovine Albumin .

المرحلة الثانية وهي لعمل الـ Patient Control

1. يحضر أنبوب واحد One Tube للكنترول Control لكل عينة مريض يطلب اختبار التوافق Cross Matching بغض النظر عن عدد أكياس التبرع المطلوبة له .

2. يضاف إلى الأنبوب قطرتين 2 drops من سيرم المريض Patient Serum

3. يضاف إلى الأنبوب قطرتين 2 drops من سيرم المريض Patient Cells

4. تضاف قطرتين 2 drops من Bovine Albumin .

المرحلة المشتركة :

1. يوضع أنبوب الـ Cross Matching (المرحلة الأولى) وأنبوب الـ Patient Control (المرحلة الثانية) في Incubator على درجة حرارة 37مْ لمدة 30 دقيقة .

2. غسل Washing الأنبوبين (Cross Matching Tube و Patient Control Tube) ثلاث مرات بالـ Normal Saline بطريقة يدوية أو أوتوماتيكية .

3. يضاف إلى الأنبوبين قطرتين 2 drops من Coombs Serum أو ما يسمى بـ Anti Human globulin (AHG) .

4. يوضع الأنبوبين بجهاز الطرد المركزي Centrifuge لمدة 10-15 ثانية فقط وذلك من أجل مزج Mixجيد .

5. يفحص الأنبوبين تحت المجهر الضوئي ، إذا لم يحدث تخثر NonAgglutination فهي Compatible ، وإذا حدث التخثر Agglutination كانت Incompatible .

• إذا حدث التخثر Agglutination تحت المجهر في أنبوبة اختبار الـ Cross Matching يدل هذا على أنه لا يوجد توافق بين المريض وكيس المتبرع ، في هذه الحالة يتم تغيير كيس المتبرع بكيس متبرع آخر ويجرى نفس الاختبار المذكور أعلاه

• إذا تكرر عدم التوافق بين عينة المريض المستقبل وأكياس عديدة من دم المتبرعين يجرى اختبار Cross Matching بطريقة Warm Technique (التقنية الدافئة) وذلك بإجراء كل اختبار الـ Cross Matching أعلاه على درجة حرارة 37مْ .

وصف نتائج اختبار Cross Matching :

• في حالة التوافق Compatible

لا يكّون ارتباط بين الأجسام المضادة للشخص المستقبل للدم وانتيجينات خلايا دم المتبرع وبعد عمل الغسيل Washing تزول الأجسام المضادة ، وبعدها يضاف(Anti Human globulin) AHG والذي وظيفته البحث عن الأجسام المضادة الخاصة بالشخص المستقبل والتي زالت بواسطة الغسيل ، وبذلك تكون بالفحص تحت المجهر Non Agglutination (Compatible)

بعد ذلك يتم التأكد من التوافق بإضافة Coombs Control Cell (CCC) والذي وظيفته البحث عن AHG فيتكون الارتباط مع AHG المضاف سابقاً ، وبذلك تكون بالفحص تحت المجهر عكسية أي Agglutination (+)

• في حالة عدم التوافق Incompatible

يكّون ارتباط بين الأجسام المضادة للشخص المستقبل للدم وانتيجينات خلايا دم المتبرع وبعد عمل الغسيل Washing لا تزول الأجسام المضادة لأنها مرتبطة مع الانتيجينات ، وبعد إضافة AHG الذي يربط الأجسام المضادة المرتبطة مع الانتيجينات مع بعضها البعض حتى تكون أوضح بالفحص تحت المجهر والتي تكون نتيجته (+)Agglutination .

 

باختصار وبطريقة مبسطة

 اختبار التوافق Compatibility test .

يسمى هذا الاختبار باسم Cross matching أو X matching .

 - ويجرا هذا الاختبار لتأكد من توافق فصائل الدم بين دم المتبرع ودم المستقبل ، ويعطى المستقبل فصيلة دم مقاربة

خطوات العمل :-

1- اخذ قطرتين من دم المتبرع ويتم غسل كريات الدم الحمراء بمحلول فسيولوجي متعادل normal saline.

2- يتم فصل سيرم دم المريض وتوضع قطرتين من السيرم مع كريات الدم الحمراء المغسولة سابقا .

3- وضع الأنبوبة المحضرة في جهاز الطرد المركزي لمدة 10 ثواني عند 500لفه / دقيقة .

4- يتم فحص الخليط تحت الميكروسكوب لتأكد من وجود تكتل لكريات الدم الحمراء أو تحلل دموي ، في حالة وجود ذلك تعتبر عينة دم المتبرع غير مطابقة لعينة دم المستقبل ويتم اخذ عينة دم أخرى ومعاملتها حسب الخطوات السابقة بعد التأكد من مجموعات الدم (A'B'O System) .

5- في حالة عدم وجود تجلط توضع نقطتين من كاشف (AHG)Anti human globulin و يتم تحضين الأنبوبة في حمام مائي عند 37ْم لمدة 20-30 دقيقة .

6- توضع الأنبوبة في جهاز الطرد المركزي من 10-15 ثانية عند 500لفة / دقيقة .

7- يتم فحص قطرة من الأنبوبة على شريحة زجاجية تفحص تحت الميكروسكوب في حالة عدم وجود تكتل لكريات الدم الحمراء تعتبر فصيلة دم المتبرع موافقة لفصيلة دم المستقبل .