قسم الهيماتولوجى Haematology

  قسم الهيماتولوجى Haematology "

< تحليل صورة الدم الكاملة >

> Complete Blood Chemographic <

نستكمل سويا اخر جزء فيصورة الدم وهو ازاى اعد خلايا الدم البيضاء وازاى افرد فيلم دم واصبغه للعد النوعي لخلايا الدم البيضاء ........

-----> اولا :- تعداد كرات الدم البيضاء WBC, white blood cell :-

ويمكن تسميتها ايضا Total Leucocyte Count , TLC وهو يفحص التعداد الإجمالي لكريات الدم البيضاء .

- وظيفة كريات الدم البيضاء مكافحة الجراثيم، الفيروسات التي تهاجم الجسم وأيضا الخلايا السرطانية.

- هناك عدة أنواع ومجموعات من كريات الدم البيضاء : -

ازينوفيل ، ليمفوسيت ، نيتروفيل ، مونوسيت , بازوفيل .

- وحسب نوع التلوث يتحدد ارتفاع عدد كريات في احدى المجموعات

- على سبيل المثال :-

في التلوث الذي يتسبب من الجراثيم يزداد خاصة خلايا النيتروفيل ، والتلوث المتسبب من الفيروسات يزداد الليمفوسيت والمونوسيت وفي حالة الحساسية أو تلوث بسبب طفيليات تزداد كلا من الايزينوفيل البازوفيل .

----> ثانيا : متى يوصى بإجراء فحص كرات الدم البيضاء ؟؟؟؟؟

عند وجود شك لمرض تلوثي، أو عند وجود شك في تراجع في عمل جهاز المناعة .

-----> ثالثا : المستوى الطبيعي لخلايا الدم البيضاء :-

4000 حتى 11000

----------> ما معنى قيم منخفضة عن المستوى الطبيعي ؟؟؟؟؟

في هذه الحالة التعبير الطبي هو لويكوبينيا Leucopenia والمعنى هو تراجع وقصور في عمل جهاز المناعة. يمكن لهذا أن يحدث نتيجة لتلوثا ت حادة، من أمراض فيروسية مختلفة مثل الايدز أو حتى بسبب فيروسات اقل خطورة منه، التي تسبب قصور عابر لجهاز المناعة. وأيضا الأدوية ضد الأورام سرطانية يمكنها أن تسبب بوجود قيم منخفضة.

وأحيانا هناك قيم منخفضة بسبب ميول للويكوبينيا عند مجموعة دون وجود مغزى طبي وفي هذه الحالة تعتبر قيم سليمة، كما هو الحال عند اليمنيين في البلاد ، وتدعى هذه الحالة لويكوبينيا أثينية.

----------> ما معنى قيم أعلى من المعدل الطبيعي ؟؟؟؟؟

عند وجود ارتفاع كبير في كريات الدم البيضاء بالدم Leucocytosis، غالبا ما يدل هذا على وجود تلوث. يمكن معرفة نوع التلوث من نوع كريات الدم البيضاء التي سجل فيها الارتفاع. إذا كانت القيم كبيرة جدا, بشكل حاد فوق عشرات الآلاف يمكن أن تولد الشك بوجود سرطان الدم (لويكيميا ) .

----> رابعا : طريقة عد خلايا الدم البيضاء :-

1.. طريقة تحضير المحلول الخاص بعد خلايا الدم البيضاء :-

- يتم ذلك باضافة (20 مل) من المحلول (Glacial acetic acid)

مع (من 1 الى 2 نقطة) من (methylene blue) ....

2.. خطوات العمل :-

- يتم اضافة (950 ميكرون ) من المحلول التى تم تحضيرة..الى انبوبه الاختبار..

- يتم اضافة (50 ميكرون) من الدم + EDTA الي انبوبة اختبار .

- يتم خلط العينة جيداااااا لمدة دقيقتين...

او :-

- يتم اضافة (380 ميكرون ) من المحلول التى تم تحضيرة..الى انبوبه الاختبار..

- يتم اضافة (20 ميكرون) من الدم + EDTA الي انبوبة اختبار .

- يتم خلط العينة جيداااااا لمدة دقيقتين...

ثم بعد ذلك

- يتم اخذ (20 ميكرون) من الخليط بواسطة الماصة الاوتوماتيكية...

- يتم وضعهم فى شريحة العد ... الهيموسيتوميتر... في ال Chamber المخصص لذلك .

- يتم عد كرات الدم البيضاء فى (4) مربعات بالميكروسكوب باستخدام العدسة 10X او 40X ....

--------> طريقة ثانية

- بواسطة المجهر وشريحة العد Haemocytometer

- محلول التخفيف يحلل كريات الدم الحمراء ويصبغ انويه كريات الدم البيضاء بلون بنفسجي فيسهل عدها.

- كيفية العمل :-

1- يخفف الدم 2:1 باستخدام الماصة ذات الانتفاخ المدرجة 0.5 ، 1 ، 11 بملئها بالدم حتى علامة 0.5 ثم بالمحلول حتى علامة 11.

2- يمكن عمل نفس التخفيف 20 ميكروليتر إلى 0.38 مل من المحلول ( باستعمال الماصة الأوتوماتيكية ) في أنبوبة زجاجية.

3- ترج الأنبوبة جيدا.

4- تملا شريحة العد بواسطة ماصة باستير بعد وضع غطاء زجاجي للشريحة.

5- تعد كريات الدم البيضاء في المربعات الأربعة الخارجــــية باستخدام العدسة الشيئية ( *10) للمجهر

-----> خامسا : طريقة الحساب :-

- مجموع عدد كرات الدم البيضاء فى الاربع مربعات ... ويتم ضربهم فى العدد (50)

- في بعض المعامل بتقوم بعد مربع واحد وتقوم بضرب في العدد 200 .

- وفي بعض المعامل الاخري تقوم بعد اي مربعين متقابلين وتقوم بالضرب في العدد 100 .

ولكن الافضل اننا نقوم بعد الاربع مربعات ونقوم بضرب مجموع الاربع مربعات في العدد 50 .

------> سادسا : بعض الاحتياطات الواجب اتخاذها لضمان صحة النتائج :-

1- عدم وجود فقاعات هوائية بشريحة العد...

2- بعد ان يتم وضع العينة فى شريحة العد ..يجب الانتظار لمدة دقيقتين لكى يتم ترسيب الخلايا .. وبالتالى القدرة على عدها بطريقة صحيحة..

3-عدم ترك شريحة العد لاكثر من دقيقتين..لكى لا يجف المحلول...

4- يجب التأكد من نظافة الشريحة وغطائها الزجاجي قبل الاستخدام

5- يجب استخدام الغطاء الزجاجي المخصص لشريحة العد وذلك لأنه سميك و ثقيل بالقدر الكافي

-------> سابعا : العد النوعي لكريات الدم البيضاء Differential Leucocytic Count :-

كما ذكرنا من قبل انه يحدد النسبة المئوية لكل نوع من خلايا الدم البيضاء ويأتى بالكشف عن كل نوع من خلايا الدم البيضاء في كل مائة كرة بيضاء متتالية في افلام مفروده ومصبوغة .

* * تحضير أفلام الدم : -

1. تنظف الشرائح جيدا قبل استعمالها مباشرة.

2. توضع نقطة صغيرة من الدم علي بعد 1 – 2 سم من أحـــــد أطرافها في منتصف الشريحة .

3. تفرد نقطة الدم باستعمال شريحة أخري طرفها أملس ناعم ( ويفضل أن يقل عرضها عن الأولى ) يوضع هذه الشريحة فوق الشريحة الأولي بزاوية 45 ْ وتحرك إلى الوراء حتى تفرد نقطة الدم وتملأ خط التماس بين الشريحتين.

4. يفرد الفيلم بسرعة وبخفة إلى الأمام .

5. يترك الفيلم في الهواء ثم يصبغ بصبغة ليشمان.

* * هناك بعض المواصفات للفيلم الجديد وهى كالاتى : -

1. متوسط السمك.

2. يملأ ثلثي الشريحة.

3. له راس وذيل.

4. الدم المفرود غير متقطع علي الشريحة.

* * طريقة صبغ الأفلام بـ(صبغة ليشمان) : -

1. توضع الشريحة علي حامل حوض الصبغة.

2. توضع الصبغة وتترك لمدة 2 – 3 دقائق.

3. يضاف ماء مقطر ضعف كمية الصبغة ويتم مزج الماء بالصبغة.

4. تترك الصبغة المخففة لمدة 7 – 10 دقائق علي الشريحة.

5. تغسل الشريحة بالماء الجاري لمدة دقيقتين ويترك الفيلم ليجف وتنظف الجهة الأخرى من الشريحة لإزالة بقايا الصبغة.

* * طريقة فحص الأفلام : -

تعد كريات الدم البيضاء باستخدام العدسة الزيتية في خط يقطع الفيلم بالعرض من الرأس للذيل بعيدا عن الأطراف الجانبية حتى يتم عد 100 خلية بيضاء.

ولتحقيق نتيجة اكثر دقة يعد 200 خلية بيضاء..

بعد ذلك نقوم بحصر عد كل نوع يمثل كم في ال 100 خلية ..