مختبرات طبــ🔬ــية 22.11.2016 10:33:45
♻ ــ اختبارات الإنزیمات : ــ
➢ Catalase
H2O2⇶ H2O + O2
والاختبار الإیجابي یحدث فوران وتصاعد غاز O2 عند إضافة البكتریا إلى محلول فوق أكسید الھیدروجین مثل المكورات العنقودیة .
➢Oxidase
reagent Oxidase ⇶ لون احمر قرمزي
مثل النیسیریا الممرضة .
➢ Urease
Urea⇶ NH3
بعض أنواع البكتریا تكسر الیوریا إلى أمونیا التي تحول الأس الھیدروجیني إلى قلوي شدید فیتغیر لون الكاشف فینول الأحمر من اللون الأصفر إلى اللون الأحمر مثل بكتریا البروتیس.
🔰یتم عمل الاختبارات البیوكیمیائیة فقط للتفریق بین عصیات البكتریا السالبة السالبة للجرام وھم 12 نوع أھمھا 5 أنواع وھم : ـ
➢TSI ــــــــ السكر الثلاثي .
➢Lysin ـــــــــ لایسین .
➢MIOــــــــ
اختبار الإندول والحركة والأورنثین .
➢ Citrate ــــــــ ستریت .
➢Urea ــــــــــ الیوریا
➢ @laboratory1 #مختبرات_طبية
➢ #البوت @laboratory12_bot
Dair
09:59
م
مختبرات طبــ🔬ــية 22.11.2016 10:33:45
1⃣ ــ أنبوبة TSI السكریات الثلاثیة
💠* اختبار السكریات الثلاثیة : ــ یحتوي أنبوبة TSI على 3 سكریات وھم الجلوكوز – اللاكتوز – السكروز.
المیكروب الذي یخمر الثلاث سكریات یعطي لون أصفر في كل أنبوبة .
g جلوكوز 0.1%
L لاكتوز 1%
S سكروز 1%
أملاح حدید Iron للكشف عن H2S
💠 المیكروب الذي یخمر سكر الجلوكوز فقط : ــ یعطي لون أحمر (Slant( وأصفر في (Butt (
💠 اختبار وجود H2S : ــ - إذا كان المیكروب یتفاعل مع أملاح الحدید Iron یعطيH2S إیجابي
فیصبح اللون أسود .
- إذا كان المیكروب لا یتفاعل مع أملاح الحدید Iron یعطيH2S سلبي ولا یصبح اللون أسود .
💠 اختبار وجود الغاز : ــ - المیكروب الذي یعطي غاز یحدث تكسیر في المیدیا .
- المیكروب الذي لا یعطي غاز لا یحدث تكسیر في المیدیا
@laboratory1 #مختبرات_طبية
2⃣اللایسین Lysine
ve+
یستمر لونه بنفسجي في كل انبوبه
ve-
یعطي لون أصفر في Butt
♻الحالة الوحیدة التي تعطي لون بني محمر (مارون)ھي مع میكروب البروتیس Protus ) لون العنب الأحمر في الـ ( Slant أي الخارج) فقط
➢ @laboratory1 #مختبرات_طبية
➢ #البوت @laboratory12_bot
Dair
09:59
م
مختبرات طبــ🔬ــية 22.11.2016 10:33:45
3 ــ تفاعل MIO
🕳️ O
أورنثین Ornthin
⇦الإیجابي : ــ یستمر اللون بنفسجي
⇦ السلبي : ــ یصبح اللون أصفر
🕳️ I
اندول Indol
⇦ یضاف كوفاك s,Kovac
⇦ الإیجابي : ــ حلقة حمراء .
⇦ السلبي : ــ حلقة صفراء.
🕳️M
⇦الحركة Motility
⇦ الإیجابي : ــ متحرك ینتشر المیكروب نتیجة الحركة في كل الأنبوبة .
⇦السلبي ــ غیر متحرك ویوجد
المیكروب على خط الزرع فقط
🕳️ الحركة : ــ المقصود بھا ھو أن یكون خط الزرع منتشر في الأنبوبة وتكون المیدیا في الأنبوبة معكرة في وسطھا ویكون لونھا مغیم ولیس رائق
4⃣ ــ أنبوبة الستریت Citrate : ــ
☜یكون لون أزرق في في حالة الإيجابي
☜یكون أخضر في حالة السلبي
@laboratory1 #مختبرات_طبية
5⃣ــ أنبوبة الیوریا Urea : ــ
⇦ أحمر فوشیا في حالة الايجابي
⇦ أصفر في حالة السلبي
➢ @laboratory1 #مختبرات_طبية
➢ #البوت @laboratory12_bot
Dair
09:59
م
مختبرات طبــ🔬ــية 22.11.2016 18:12:11
🕳️ ھكذا قد تم عرض فكرة صغیرة وعامة عن التفاعلات البیوكیمیائیة ولكن قبل عرض حالات التفاعلات مع البكتریا وكیفیة التعرف على نوع البكتریا منھا یجب أولاً أن نتعرف كیف نزرع البكتریا علیھا : ــ
1 ــ یتم زرع العینة على الماكونكي ثم تترك لمدة 24 ساعة في الحضان أي لمدة یوم ثم نأخذ الـColoni التي ظھرت ثم نزرعھا في أنابیب التفاعلات البیوكیمایئیة ، ولقد زرعنا العینة على الماكونكي وذلك لنعرف إن كانت البكتریا سالبة للجرام أم موجبة للجرام . فإن كانت سالبة للجرام لا تظھر Coloni على طبق الماكونكي وإن كانت موجبة للجرام تظھر الـColoni على الطبق وھذه خاصیة ومیزة قد ذكرناھا في مستنبت الماكونكي بأن تنبت علیھ المیكروبات الموجبة للجرام ولا تنبت ولا تظھر السالبة للجرام .
2 ــ نقوم بوضع أنابیب التفاعلات البیوكیمیائیة بالترتیب في حامل أنابیب
3 ـــ نأخذ لوب معقم ونمسكه من وسطھ . وكما ھو معروف أن اللوب له ناحیتین ناحیة حلقة وناحیة إبرة أو مدببة .
4 ــ نمسك من وسط اللوب ونأخذ بالناحیة المدببة من الـColoni التي ظھرت على طبق الماكونكي ونبدأ في الزرع
5 ــ نقوم بزرع الـColoni في الأنابیب ونبدأ بأنبوبة MIO الأنبوبة الوسطى وذلك بأن ننزل اللوب في وسط الأنبوبة ثم نخرجھا في نفس الاتجاه ، ثم نرجع إلى الأنابیب ونزرع بالباقي من Coloni الموجودة في اللوب على المیدیا المائلة الموجودة في الأنابیب
6 - ــ ثم نضعھا في الحضان لمدة 24 ساعة ثم تقرأ بعد ذلك لنعرف نوع البكتریا الموجودة
➢ @laboratory1 #مختبرات_طبية
➢ #البوت @laboratory12_bot
Dair
09:59
م
مختبرات طبــ🔬ــية 22.11.2016 18:13:17
🕳️ فیما یلي بعض أنواع البكتریا التي تظھر على المستنبتات في الأنابیب : ــ
➢ Klebsiella Pneumoniae
* في حالة الكلیبسیلا : ــ نجد أن ☆ أنبوبة الیوریا☜ إیجابي .
☆ وأنبوبة الستریت ☜ إیجابي .
☆ وأنبوبة اللایسین ☜ إیجابي .
☆ أما أنبوبة الـ MIO ☜ سلبي من ناحیة الأورنثین والحركة والإندول فتعطي لون أصفر .
☆ وأنبوب ة TSI یصبح لونھا مائل للصفرة وذلك لأنھ تم تخمیر السكریات الثلاثة الموجودة بها وتكون الأنبوبة A/A أي حمض على حمض وھذا یدل على تخمیر جمیع السكریات
@laboratory1 #مختبرات_طبية
🕳️ ــ 2️⃣
➢ E . Coli
* في حالة الإیشیریشیا كولاي : ــ نجد أن
⇦أنبوبة الیوریا ☜ سلبي .
⇦ أنبوبة والستریت ☜ سلبي .
⇦ أنبوبة اللایسین ☜ إیجابیة .
⇦ وأن أنبوبة MIO تكون ☜ إیجابیة للإندول ویعطي لون بني عند وضع كاشف كوفاك على جدار الأنبوبة .
☆ وإیجابیة للحركة فھى متحركة فنجد أنھ حول خط الزرع غیام أو عكارة .
☆وإیجابیة للأورنثین بنسبة %65 ، الأورنثین ھو نوع من أنواع السكریات .
⇦ وفي أنبوبة الTSI نجد أنه قد تم تخمیر السكریات الموج ودة بالأنبوبة وتكون الأنبوبة A/A أي حمض على حمض وھذا یدل على تخمیر جمیع السكریات.
➢ @laboratory1 #مختبرات_طبية
➢ #البوت @laboratory12_bot
Dair
09:59
م
مختبرات طبــ🔬ــية 22.11.2016 18:13:45
➢Entero Bacter aerogens
🕳️ في حالة الإنتیروباكتر : ــ نجد أن
⇦ أنبوبة الیوریا ☜ سلبي .
⇦ أنبوبة الستریت ☜إیجابي .
⇦ أنبوبة اللایسین☜ إیجابي .
⇦وأنبوبة MIO نجد فیھا الإندول سلبي .
وھي متحركة والأورنثین إیجابي بنسبة %100 .
⇦وأنبوبة الـ TSI نجد أنه قد تم تخمیر السكریات الموجودة بالأنبوبة وتكون الأنبوب ة A/A أيحمض على حمض وھذا یدل على تخمیر جمیع السكریات
@laboratory1 #مختبرات_طبية
➢ Entero Bacter Cloaca
نوع آخر من الإنتیروباكتر : ــ نجد أن
⇦ أنبوبة الیوریا☜ سلبي .
⇦أنبوبة الستریت ☜إیجابي .
⇦ أنبوبة اللایسین ☜سلبي .
⇦وأنبوبة MIO نجد فیھا الإندول سلبي .
وھي متحركة والأورنثین إیجابي بنسبة %100 .
⇦وأنبوبة الـ TSI نجد أنه قد تم تخمیر السكریات الموجودة بالأنبوبة وتكون الأنبوب ة A/A أي حمض على حمض وھذا یدل على تخمیر جمیع السكریات
@laboratory1 #مختبرات_طبية
➢Salmonella para A
🕳️ في حالة السالمونیلا من النوع A : ــ نجد أن
⇦ أنبوبة الیوریا☜ سلبي .
⇦ وأنبوبة الستریت☜ سلبي .
⇦وأنبوبة واللایسین☜ سلبي .
⇦وأنبوبة MIO نجد فیھا الإندول سلبي .
وھي متحركة والأورنثین إیجابي بنسبة %100 .
⇦وأنبوبة الـ TSI نجد أنه تم تخمیر بعض السكریات وتم تكوین غاز وتكون الأنبوبة A/K
@laboratory1 #مختبرات_طبية
➢ Salmonella typhi
في حالة السالمونیلا نجد أن : ــ
⇦أنبوبة الیوریا ☜سلبي
⇦أنبوبة السترات☜ سلبي
⇦ أنبوبة اللایسین ☜ إیجابي %100
⇦وفي أنبوبة MIO : ــ نجد فیھا ☜الإندول : ــ سلبي .
☜ الحركة : ــ متحركة .
☜ سكر الأورنثین : ــ سلبي .
⇦وفي أنبوبة الـ TSI : ــ نجد أنه قد تم تخمیر مع بعض السكریات وتم التفاعل مع عنصر الحدید تكون H2S وغاز وتكون الأنبوبة A/K
➢ @laboratory1 #مختبرات_طبية
➢ #البوت @laboratory12_bot
Dair
09:59
م
مختبرات طبــ🔬ــية 22.11.2016 18:14:36
➢Salmonella para B
في حالة السالمونیلا من النوع B نجد أن : ــ
⇦ أنبوبة الیوریا☜ سلبي .
⇦ أنبوبة السترات ☜ إیجابي .
⇦ أنبوبة اللایسین ☜ إیجابي .
⇦في أنبوبة الـ MIO : ــ نجد أن : ــ
☜الحركة : ــ متحركة .
☜الإندول : ــ سلبي .
☜ الأورنثین : ــ إیجابي .
⇦ في أنبوبة TSI : ــ نجد أن تم التخمیر مع السكریات وتم التفاعل مع عنصر الحدید الموجود في الأنبوبة وأعطى H2S وتكون الأنبوبة A/K
@laboratory1 #مختبرات_طبية
➢ Shegilla
في حالة الشیجیلا نجد أن : ــ
⇦أنبوبة الیوریا☜ سلبي .
⇦ أنبوبة السترات ☜ سلبي .
⇦أنبوبة اللایسین ☜ سلبي %100
⇦في أنبوبة MIO: ــ نجد أن : ــ
☜الحركة : ــ غیر متحركة %100 .
☜ الإندول : ــ سلبي .
☜ سكر الأورنثین: ــ سلبي .
☜في أنبوبة TSI : ــ نجد أنه تم تخمیر بعض السكریات ولم تم تفاعل عنصر الحدید الموجود فلا یوجد H2S ولا غاز وتكون الأنبوبة في ھذه الحالة A/K
@laboratory1 #مختبرات_طبية
➢ Proteus Valgaltis
في حالة ھذا النوع من البروتیس نجد أن : ــ
⇦أنبوبة الیوریا تكون☜ إیجابي بعد 4 ساعات من الزرع
⇦ أنبوبة السترات قد تكون سلبي .
⇦أنبوبة اللایسین ☜ إیجابي من النوع deaminase .
⇦ في أنبوبة الـ MIO : ــ نجد أن
☜الحركة : ــ متحركة .
☜الإندول : ــ سلبي .
☜ سكر الأورنثین : ــ سلبي .
☜أنبوب ة ال ـ TSI : ـ ـ قد تم تخمیر سكریات وتم تفاعل عنصر الحدید الموجود في الأنبوبة وتكون H2S وتكون الأنبوبة في ھذه الحالة A/A
@laboratory1 #مختبرات_طبية
➢ Proteus Mirobilis
في حالة ھذا النوع من البروتیس نجد أن : ــ
⇦أنبوبة الیوریا ☜ تكون إیجابي بعد 4 ساعات من الزرع
⇦ أنبوبة السترات قد تكون سلبي .
⇦ أنبوبة اللایسین┗☜ إیجابي من النوع deaminase .
⇦في أنبوبة الـ MIO : ــ نجد أن
☜الحركة : ــ متحركة .
☜ الإندول : ــ سلبي .
☜ سكر الأورنثین : ــ إیجابي .
☜أنبوبة ال ـ TSI : ـ ـ قد تم تخمیر سكریات وتم تفاعل عنصر الحدید الموجود في الأنبوبة وتكون H2S وتكون الأنبوبة في ھذه الحالة A/K
➢ @laboratory1 #مختبرات_طبية
➢ #البوت @laboratory12_bot
Dair
09:59
م
مختبرات طبــ🔬ــية 22.11.2016 18:15:02
➢Pseudomonas aeruginosa
في حالة السودومونس : ــ نجد أن : ــ
⇦ أنبوبة الیوریا ☜سلبي وتعطي إیجابي بعد 5 أیام .
⇦ أنبوبة السترات ☜إیجابي .
⇦ أنبوبة اللایسین☜ لا یوجد تفاعل .
⇦في أنبوبة MIO ــ نجد أن : ــ ☜الحركة : ــ متحركة .
☜ الإندول : ــ سلبي .
☜ سكر الأورنثین : ــ لا یوجد تفاعل Reacti.on NO .
✧في أنبوبة TSI ـ ـ نجد أنه قد دخلت السكریات في التفاعل ولا یوجد H2S ولا غاز . وتعطي Metalicshine
وتكون الأنبوبة -/k
@laboratory1 #مختبرات_طبية
➢Marganella
في حالة المارجینیلا : ــ نجد أن : ــ
⇦ أنبوبة الیوریا☜ سلبي .
⇦ أنبوبة السترات☜ سلبي .
⇦ أنبوبة اللایسین ☜إیجابي من نوع deaminase .
⇦في أنبوبة MIO ــ نجد أن : ــ
☜الحركة : ــ غیر متحركة %100 .
☜ الإندول : ــ إیجابي .
☜ سكر الأورنثین : ــ سلبي .
⇦في أنبوبة TSI : ــ تم تفاعل السكریات وقد أعطت غاز وتكون الأنبوبة A/K
➢ Providencia
في حالة البروفیدینسیا : ــ نجد أن
⇦أنبوبة الیوریا ☜ سلبي .
⇦ أنبوبة السترات ☜ إیجابي .
⇦ أنبوبة اللایسین إیجابي من نوع deaminase .
⇦في حالة أنبوبة MIO : ــ نجد أن :
☜ الحركة : ــ متحركة .
☜ الإندول : ــ إیجابي .
☜ سكر الأورنثین : ــ إیجابي .
⇦في حالة أنبوبة TSI : ــ نجد أنھ قد تم تفاعل السكریات ولا یوجد H2S ➢ @laboratory1 #مختبرات_طبية
➢ #البوت @laboratory12_bot
Dair
09:59
م
مختبرات طبــ🔬ــية 23.11.2016 11:27:55
🕳️الصبغات
🕳️ أولاً : ــ صبغة الجرام : ــ
وھى تفرق بین البكتریا الإیجابیة للجرام والسالبة الجرام .
☜ صبغة الجرام : ــ ھي إحدى الصبغات المركبة وتنقسم البكتریا من حیث اكتسابھا ھذه الصبغة إلى بكتریا إیجابیة لونھا بنفسجي وبكتریا سالبة لونھا أحمر .
ومن حیث أن یوجد أكثر من صبغة في صبغة الجرام .
🕳️ مكونات الصبغة : ــ
1 . صبغة أولیة وھى مركب المیثیل فیولیت .
2 . المثبت وھو یود الجرام .
3 . مُزيل اللون ْ وھو كحول إیثیلي 95 %
4 . صبغة مضادة وھى الكاربول فوكسن المخفف / أحمر متعادل / الصفراویل .
🕳️ تركیبة تحضیر الصبغة : ــ
1 . مركب المیثیل فیولیت : ــ یتكون من : ــ
* 1غرام میثیل فیولیت بودر .
* 100مل ماء مقطر .
تُذاب الصبغة في الھون جیداً ثم ترشح وتعبأ في الزجاجات قاتمة اللون .
2 . الیود الجرام : ــ ویتكون من : ــ * 1غرام یود معدني .
* 2 غرام یود البوتاسیوم .
* 100 مل ماء مقطر .
* یُذاب أولاً یودید البوتاسیوم في الماء جیداً ثم یضاف الیود المعدني ویتم الرج جیداً حتى الذوبان للیود ثم ترشح وتعبأ في زجاجات قاتمة اللون .
3 . مزيل اللون : ــ كحول إیثیلي 90 %؟ كحول على أسیتون .
4 . الصبغة المضادة :
كاربول فوكسین المخفف : ــ
تحضر الصبغة أولاً مركزة ثم تخفف
🕳️صبغة الكاربول فوكسین المركز : ــ
🕳️تحضیر الكواشف
1 ـ محلول الفوكسین الكحولي المركز : ــ
* 10غرام فوكسین قاعدي " بودر " Fochsin Basic .
*100 مل كحول نقي 95 . %
* ملحوظة : ــ یمكن تحضیر محلول الفوكسین ب3غرام من الفوكسین القاعدي حسب جودة الصبغة
2 ـ محلول الفینول %5:ــ
* 50 غرام من بللورات فینیك " الفینول " .
* 950 مل ماء مقطر .
* یوزن الفوكسین ثم یوضع في دورق ثم یضاف إلیھ الكحول ویوضع الدورق في حمام مائي ویتم الرج جیداً .
* نضع بللورات الفینیك في حمام مائي حتى تصبح سائلة ثم یعایر منھا 50مل في مخبار ثم تضاف إلى الماء المقطر حتى تكمل 1 لتر .
3 ـ تحضیر صبغة الزیل نلسن : ــ
أصبح الآن لدینا محلولین وھما : ــ
* محلول الفوكسین الكحولي المركز 100مل .
* محلول الفینول %5" 900مل "
یخلط المحلولین وترج جیداً ثم ترشح في زجاجة بنیة اللون . ویُكتب اسم الصبغة وتاریخ التحضیر على الزجاجة وتحفظ بعیداً عن الضوء .
* ولتحضیر صبغة مخففة یؤخذ 100 مل منھا ویضاف إلیھا 900 مل ماء مقطر مع الرج جیداً .
🕳️ طریقة الصبغة : ــ
1 . تحضیر الفیلم ویثبت على اللھب ویغمر بالمیثیل فیولیت لمدة 1 دقیقة .
2 . تسكب الصبغة في الحوض .
3 . نغطي الشریحة بیود الجرام لمدة 1 دقیقة ونسكب الصبغة في الحوض .
4 . نغسل الشریحة بالماء الجاري ونضع على الشریحة بعض من الكحول الإیثیلي 95 % لعدة ثواني مرتین ثم نغسل الشریحة بالماء الجاري وتغطى الشریحة بالكاربول فوكسین المخفف أو الأحمر المتعادل .
5 . تسكب الصبغة في الحوض وتغسل الشریحة بالماء الجاري وتترك لیجف وتضع نقطة من الزیت ونفحص بالعدسة الزیتیة
➢ @laboratory1 #مختبرات_طبية
➢ #البوت @laboratory12_bot
Dair
09:59
م
No comments:
Post a Comment
اكتب تعليق حول الموضوع