Blank 

●البلانك يعني  تصفير او طرح امتصاصية المواد المتداخلة من قيمة الامتصاصية الكلية للفحص .

●الامتصاصية الكلية للفحص هو:( امتصاصية المواد المتداخلة + امتصاصية المادة تحت الفحص ).

●للحصول على امتصاصيه الماده الهدف فقط واستبعاد امتصاصيه المواد المتداخلة نستخدم البلانك.

●إذا التصفير في البلانك يلغي امتصاص المواد المتداخلة .

●هناك الكثير من المواد ، سواء كانت موجودة ضمن محلول الفحص او ضمن المصل المُضاف للمحلول، تكون لها امتصاصية مشابهة او قريبة من امتصاصية المادة الهدف وتمتص الضوء عند نفس الطول الموجي المُستخدم. مثل هذه المواد تسمى بالمواد المتداخلة او

Interfering substance

والتي يجب التخلص من امتصاصيتها ب استخدام البلانك  بتصفيرها.

●أنواع البلانك:

1. Reagent Blank

2. Sample Blank

●المواد المتداخلة :

1.مواد لا تحدث تفاعلات ولا تنتج مواد جديده لكن لها لون موجوده ضمن محلول الفحص

2. مواد لا تحدث تفاعلات ولا تنتج مواد جديده لكن لها لون موجوده ضمن العينه المضافة للمحلول.   

3.مواد لا لون لها وانما الامتصاصية تأتي بسبب تفاعلها مع المحلول وانتاج مادة جديدة

A. Reagent Blank:

●أولا : المواد المتواجده في المحلول والتي يمكنها ان تعطي امتصاصية تشارك بها الامتصاصية الكلية للتيست يتم استخدام بلانك يسمى

reagent blank

●المواد المتداخلة والتي تكون ضمن محلول الفحص نتخلص منها ب بلانك المحلول أي نصفر الجهاز ب بلانك ويسمى

reagent blank

●يتم تصفير الجهاز بالمحلول اولاً كبلانك، ومن ثم نعمل تيست ونقرأ الامتصاصية، وان هذه الامتصاصية الناتجة بعد التصفير، تكون فقط للمادة المراد معرفة تركيزها.

●إذا هنا  تصفّر الجهاز بالمحلول اذا كان له لوناً او يعطي قراءة ولو بسيطة.

B. Sample Blank

●ثانيا: المواد المتواجدة في السيرم والتي يمكنها ان تعطي امتصاصية تشارك بها الامتصاصية الكلية للتيست على شكلين:

1.  من المواد المتداخلة من لا تُحْدث تفاعلاً فلا تُنتج مواد جديدة، ومشاركتها بالامتصاصية تأتي بسبب كون هذه المواد المتداخلة ملوّنة او مُسبببب للتعكُر.

●اذا كانت المواد تتداخل بلونها فيمكن فصل المحلول الى محلولين وعمل ما يسمى بالـ

sample blank

●بمعنى ان يتم تصنيع المحلول على شكل محلولين ( R1& R2 )

●احدهما يحتوي على المواد الاساسية والفعّالة وهو ما يسمى بالـ

Active or Start Reagent

●والاخر يحتوي على المواد الغير فعّالة ويسمى بالـ

Innate Reagent

●فيضاف سيرم الى تيوب يحتوي على المحلول الغير فعّال، ويُضاف سيرم ايضاً الى تيوب آخر يحتوي على خليط من المحلولين ( الفعّال + الغير الفعّال ).

●فلا يحدث تفاعل في التيوب الاول وسيتم التخلص فقط من لون المواد المتداخلة بإستخدام التيوب كـسامبل بلانك، بينما يحدث التفاعل في  التيوب الآخر لانه يحتوي على كلا المحلولين.

●مثال على ذلك فحص البليروبين.

يتبع Blank

2. ومنها من من لا لون لها وانما الامتصاصية تأتي بسبب تفاعلها مع المحلول وانتاج مادة جديدة يمكنها ان تمتص من طاقة الضوء المُستخدم.

هنا نستخدم ما يُعرف بالـ

Selected Time Windows for Rate Reactions

● مثال على ذلك فحص الكرياتينين.

●في فحص الكرياتينين وبإستخدام طريقة جاف هناك مواد في السيرم غير الكرياتينين كالـ اسيتواسيتات وبعض البروتينات تتفاعل عند وجودها بمحلول الكرياتينين وتعطي لوناً مشابهاً للون الذي يعطيه الكرياتنين فتزيد الامتصاصية الكلية للفحص.

●اذاً كيف سيتم التخلص من  الامتصاصية الزائدة التي تتكون في تيوب التيست ولا تتكون في تيوب البلانك؟

في طريقه

Selected Time Windows for Rate Reactions

●يتم اضافة مواد تغيّر من صفات المحلول وتؤثر على سرعة التفاعل. ففي محلول الكرياتنين وعند زيادة قاعدية المحلول فإن الاسيتواسيتات المُتداخل يتفاعل بسرعة كبيرة في حدود العشرين الثانية الاولى، وسرعة تفاعل البروتينات المتداخلة تكون بطيئة وتبدأ بالتفاعل من بعد دقيقة - دقيقتين، بينما يبدأ وينتهي تفاعل الكرياتنين مابينهما. فتتم قراءة الامتصاصية عند نقطتين: ما بعد انتهاء تفاعل الاسيتواسيتات وقبل تفاعل البروتينات المتداخلة.

●فتكون القراءة الاولى بعد نصف دقيقة تقريبا ( امتصاصية الاسيتواسيتات )

●والقراءة الثانية بعد دقيقة ونصف ( مجموع امتصاصية الكرياتنين و الاسيتواسيتات في القراءة الاولى )، بعده يتم طرح القراءة الاولى من القراءة الثانية لنحصل على قراءة الكرياتنين.

اذا في هذه الطريقه

●سيتم استبعاد اغلب - وليس كل - الامتصاصية التي حدثت في الثوان الاخيرة والناتجة من تداخل المواد البروتينية؛ لأن البروتينات يختلف بداية تفاعلها فجزء منها ما بعد الدقيقة الاولى واغلبها ما بعد الدقيقة الثانية بمعنى ان جزء بسيط منها يبدأ تفاعلها قبل انتهاء تفاعل الكرياتنين لكنها بسيطة ولا تؤثر كثيراً..

●بينما تداخل الاسيتواسيتات يُستبعد تماماً لانه يحدث في العشرين الثانية الاولى ونحن نبدأ القراءات بعد 30 ثانية

Dr

17 November 2022

ع

20:45

علم التحاليل المخبرية