ﻭﺩ ﻭﺍﻟﺬﻱ ﻳﺘﻨﺎﺳﺐ ﺗﻨﺎﺳﺐ ﻃﺮﺩﻱ ﻣﻊ ﺍﻟﻤﻘﺎﻭﻣﺔ . ﻫﺬﺍ ﺍﻟﺘﻐﻴﺮ ﻓﻲ ﺍﻟﺠﻬﺪ ﻳﺘﻨﺎﺳﺐ ﺗﻨﺎﺳﺐ ﻃﺮﺩﻱ ﻣﻊ ﺣﺠﻢ ﺍﻟﺨﻠﻴﺔ ﺍﻟﻤﺎﺭﺓ ﻋﺒﺮ ﻓﻮﻫﺔ ﺍﻟﻌﺪ , ﻭﺇﻥ ﻗﺎﻧﻮﻥ ﺃﻭﻡ ﺍﻟﻜﻬﺮﺑﺎﺋﻲ ﻳﻮﺿﺢ ﺫﻟﻚ ﻣﻦ ﺧﻼﻝ ﻣﻌﺎﺩﻟﺘﻪ :
ﺃﻭ
ﺣﻴﺚ ﺃﻥ :
E : ﺍﻟﺠﻬﺪ ﺑﻴﻦ ﻃﺮﻓﻲ ﺍﺇﻟﻜﺘﺮﻭﺩ .
I : ﻣﻘﺪﺍﺭ ﺍﻟﺘﻴﺎﺭ ﺍﻟﺜﺎﺑﺖ .
R : ﺍﻟﻤﻘﺎﻭﻣﺔ ﺑﻴﻦ ﻃﺮﻓﻲ ﺍﻹﻟﻜﺘﺮﻭﺩ ﺍﻟﻨﺎﺗﺠﺔ ﻣﻦ ﻣﺮﻭﺭ ﺍﻟﺨﻠﻴﺔ .
ﻣﻘﺪﺍﺭ ﻓﺮﻕ ﺍﻟﺠﻬﺪ ﺍﻟﺼﻐﻴﺮ ( ﻛﻘﻴﻤﺔ ) ﻳﺘﻢ ﺗﻜﺒﻴﺮﻩ ﻋﺒﺮ ﺩﺍﺋﺮﺓ ﺗﻜﺒﻴﺮ , ﻭﻳﺘﻀﻤﻦ ﺫﻟﻚ ﻭﺟﻮﺩ ﺇﺷﺎﺭﺍﺕ ﺗﺸﻮﻳﺶ ﻏﻴﺮ ﻣﻨﻄﻘﻴﺔ ﻧﺎﺗﺠﺔ ﻋﻦ ﻭﺟﻮﺩ ﻓﻘﺎﻗﻴﻊ ﻣﻦ ﺍﻟﻬﻮﺍﺀ ( Air bubbles ) ﻳﺘﻢ ﺍﻟﺨﻠﺺ ﻣﻨﻬﺎ ﻣﻦ ﺧﻼﻝ ﺩﻭﺍﺋﺮ ﺍﻟﻔﻠﺘﺮﺓ ﻛﻤﺎ ﻭﺿﺤﻨﺎﻫﺎ ﺳﺎﺑﻘﺎ .
ﻳﻌﺘﻤﺪ ﺗﻐﻴﺮ ﻣﻮﺻﻠﻴﺔ ﺍﻟﻤﺤﻠﻮﻝ ﺍﻟﻜﻬﺮﻟﻲ ( ﺍﻟﻤﺘﺠﺎﻧﺲ ﻣﻊ ﺍﻟﺪﻡ ) ﻋﻠﻰ ﺍﻟﺘﻐﻴﺮ ﻓﻲ ﺩﺭﺟﺔ ﺍﻟﺤﺮﺍﺭﺓﻭﺍﻟﻀﻐﻂ ﺍﻹﺳﻤﺰﻱ , ﻭﻟﻜﻦ ﻫﺬﺍ ﺍﻟﻤﺤﻠﻮﻝ ﺍﻟﻜﻬﺮﻟﻲ ﻳﺼﻨﻊ ﻋﻠﻰ ﺃﻥ ﻳﻜﻮﻥ ﺫﺍﺕ ﺿﻐﻂ ﺇﺳﻤﺰﻱ ﺛﺎﺑﺖ , ﻭﻟﻜﻦ ﺑﺎﻟﻨﺴﺒﺔ ﻟﻠﺘﻐﻴﺮ ﻓﻲ ﺩﺭﺟﺔ ﺣﺮﺍﺭﺓ ﺍﻟﻤﺤﻠﻮﻝ ﻓﻬﻨﺎﻟﻚ ﻣﺮﺍﻗﺒﺔ ﻟﺪﺭﺟﺔ ﺣﺮﺍﺭﺓ ﺍﻟﻤﺤﻠﻮﻝ ﻋﻦ ﻃﺮﻳﻖ ﻣﺠﺲ ﺣﺮﺍﺭﻱ ﻣﻮﺿﻮﻉ ﻋﻨﺪ ﻓﻮﻫﺔ ﺍﻟﻌﺪ ( Aperture ) ﻭﻣﻦ ﺍﻟﻤﻼﺣﻆ ﺃﻧﻪ ﻋﻨﺪ ﺯﻳﺎﺩﺓ ﺩﺭﺟﺔ ﺣﺮﺍﺭﺓ ﺍﻟﻤﺤﻠﻮﻝ ﺳﻮﻑ ﺗﺰﺩﺍﺩ ﻣﻮﺻﻠﻴﺘﻪ ﻭﺑﺎﻟﺘﺎﻟﻲ ﻳﺆﺩﻱ ﺇﻟﻰ ﺇﻧﺸﺎﺀ ﺇﺷﺎﺭﺓ ﺻﻐﻴﺮﺓ ﺍﻟﻘﻴﻤﺔ .
ﻛﻞ ﺍﻟﻨﺒﻀﺎﺕ ﺍﻟﻨﺎﺗﺠﺔ ﻣﻦ ﺍﻟﻜﺮﻳﺎﺕ ﻭﻏﻴﺮﻫﺎ ﻣﺨﺘﻠﻔﺔ ﺍﻟﺤﺠﻢ ﻟﻨﻔﺲ ﺍﻟﻨﻮﻉ ﻣﻦ ﻛﺮﻳﺎﺕ ﺩﻡ ﺣﻤﺮﺍﺀ ﺃﻭ ﺑﻴﻀﺎﺀ ﺃﻭ ﺻﻔﺎﺋﺢ ﺩﻣﻮﻳﺔ , ﻭﺑﺎﻟﺘﺎﻟﻲ ﺳﻮﻑ ﻳﻌﺪ ﺍﻟﻜﺮﻳﺎﺕ ﻣﻦ ﻧﻔﺲ ﺍﻟﻨﻮﻉ ﺍﻟﻮﺍﻗﻌﺔ ﻓﻲ ﻣﺠﺎﻝ ﻣﻌﻴﻦ ﻭﻣﺤﺪﺩ ﻣﻦ ﻗﺒﻞ ﺍﻟﻤﺒﺮﻣﺞ ﻭﻳﻬﻤﻞ ﺍﻟﺒﻘﻴﺔ ﺍﻟﻐﻴﺮ ﻭﺍﻗﻌﺔ ﻓﻲ ﻫﺬﺍ ﺍﻟﻤﺠﺎﻝ .
( ﻛﺮﻳﺎﺕ ﺍﻟﺪﻡ ﺍﻟﺒﻴﻀﺎﺀ ﺍﻟﻤﺤﻠﻠﺔ ) : ﻳﺘﻢ ﺳﺤﺐ µL 12 ﻣﻦ ﻋﻴﻨﺔ ﺍﻟﺪﻡ ﺍﻟﻜﻠﻴﺔ ﻭﺗﺨﻔﻒ ﺑﻨﺴﺒﺔ 1:250 ﻣﺴﺘﺨﺪﻣﺎ ﻣﺤﻠﻞ ﺧﺎﺹ ﻳﻘﻮﻡ ﺑﺘﺤﻠﻴﻞ ﻛﺮﻳﺎﺕ ﺍﻟﺪﻡ ﺍﻟﺤﻤﺮﺍﺀ ﻭﻏﺸﺎﺀ ﻛﺮﻳﺔ ﺍﻟﺪﻡ ﺍﻟﺒﻀﺎﺀ ﻣﺒﻘﻴﺎ ﻋﻠﻰ ﺃﻧﻮﻳﺔ ﻛﺮﻳﺎﺕ ﺍﻟﺪﻡ ﺍﻟﺒﻴﻀﺎﺀ ﻟﻴﺘﻢ ﻋﺪﻫﺎ . ﺇﻥ ﻋﻤﻠﻴﺔ ﺣﺴﺎﺏ ﻋﺪﺩ ﻛﺮﻳﺎﺕ ﺍﻟﺪﻡ ﺍﻟﺒﻴﻀﺎﺀ ﺗﺘﻢ ﺑﻌﺪ ﺃﻧﻮﻳﺔ ﻛﺮﻳﺎﺕ ﺍﺩﻡ ﺍﻟﺒﻴﻀﺎﺀ ﻭﺍﻟﺘﻲ ﺗﻜﻮﻥ ﺿﻤﻦ ﺍﻟﻤﺠﺎﻝ ﺍﻟﻤﺤﺪﺩ ﺃﻱ ﺃﻧﻪ ﻋﻨﺪﻣﺎ ﺗﻜﻮﻥ ﺣﺠﻢ ﺍﻟﻨﻮﺍﺓ ﺃﻛﺒﺮ ﻣﻦ FL 36 ﺗﻌﺪ ﻛﺮﻳﺔ ﺑﻴﻀﺎﺀ ﻭﺍﺣﺪﺓﻭﺇﺫﺍ ﺃﻗﻞ ﻣﻨﻬﺬﻩ ﺍﻟﻘﻴﻤﺔ ﻓﺈﻧﻬﺎ ﺗﻬﻤﻞ , ﻭﺑﺎﻟﺘﺎﻟﻲ ﻓﺈﻥ ﺍﻟﻘﺮﻳﺮ ﺍﻟﻨﻬﺎﺋﻲ ﺳﻮﻑ ﻳﻈﻬﺮ ﺣﻴﺚ ﺗﺪﻝ n ﻋﻠﻰ ﻋﺪﺩ ﻛﺮﻳﺎﺕ ﺍﻟﺪﻡ ﺍﻟﺒﻴﻀﺎﺀ ﻟﻜﻞ ﻓﻲ ﺍﻟﺪﻡ , ﺇﻧﻈﺮﺇﻟﻰ ﺍﻟﺸﻜﻞ ( 4 ) .
( ﻛﺮﻳﺎﺕ ﺍﻟﺪﻡ ﺍﻟﺤﻤﺮﺍﺀ ﺍﻟﻤﺤﻠﻠﺔ ﻭﺻﻔﺎﺋﺢ ﺍﻟﺪﻡ ) : ﻳﺘﻢ ﺳﺤﺐ µL 4 ﻣﻦ ﻋﻴﻨﺔ ﺍﻟﺪﻡ ﺍﻟﻜﻠﻴﺔ ﻭﺗﺨﻔﻒ ﺑﻨﺴﺒﺔ 0001:250 , ﻳﺘﻢ ﺗﺤﺪﻳﺪ ﻛﺮﻳﺎﺕ ﺍﻟﺪﻡ ﺍﻟﺤﻤﺮﺍﺀ ﺍﻟﻘﺒﻠﺔ ﻟﻠﻌﺪ ﺑﺎﺳﺘﺨﺪﺍﻡ ﻣﻘﺎﺭﻥ ﺑﺤﻴﺚ ﻳﺤﺪﺩ ﺃﻗﻞ ﻭﺃﻋﻠﻰ ﻗﻴﻤﺔ ﻟﺤﺠﻢ ﻛﺮﻳﺔ ﺍﻟﺪﻡ ﺍﻟﺤﻤﺮﺍﺀ ﻭﻫﻲ ﻛﺎﻟﺘﺎﻟﻲ ﺣﻴﺚ ﺃﻧﻪ ﻳﺠﺐ ﺃﻥ ﻳﻘﻊ ﺣﺠﻢ ﺍﻟﻜﺮﻳﺔﻓﻲ ﻫﺬﺍ ﺍﻟﻤﺠﺎﻝ ﻓﺈﻥ ﻟﻢ ﺗﻘﻊ ﻓﺈﻧﻪ ﻳﺘﻢ ﺇﻫﻤﺎﻟﻬﺎ , ﻭﺑﺎﻟﻨﻬﺎﻳﺔ ﻳﻈﻬﺮ ﺑﺎﻟﺘﻘﺮﻳﺮ ﻭﻫﺬﺍ ﻳﻌﻨﻲ ﻭﺟﻮﺩ n ﻣﻦ ﻛﺮﻳﺎﺕ ﺍﻟﺪﻡ ﺍﻟﺤﻤﺮﺍﺀ ﻓﻲ ﻛﻞ ﻣﻦ ﺍﻟﺪﻡ , ﺇﻧﻈﺮﺇﻟﻰ ﺍﻟﺸﻜﻞ ( 4 ) .
ﺃﻣﺎ ﻓﻲ ﻋﻤﻠﻴﺔ ﻋﺪ ﺍﻟﺼﻔﺎﺋﺢ ﻓﺈﻧﻪ ﻳﺤﺘﺎﺝ ﺇﻟﻰ ﺩﻗﺔ ﻣﺘﻨﺎﻫﻴﺔ ﻓﻲ ﻋﻤﻠﻴﺔ ﺍﻟﻌﺪ ﺑﺤﻴﺚ ﺃﻧﻪ ﻳﺘﻢ ﺗﺤﺪﻳﺪ ﻣﺠﺎﻝ ﺣﺠﻢ ﺍﻟﺼﻔﻴﺤﺔ ﺍﻟﻘﺎﺑﻠﺔ ﻟﻠﻌﺪ ﺃﺗﻮﻣﺎﺗﻴﻜﻴﺎ ﺑﺤﻴﺚ ﺃﻥ ﺗﺘﺮﺍﻭﺡ ﺃﻗﻞ ﻗﻴﻤﺔ ﺑﻴﻦ ﻭﺃﻋﻠﻰ ﻗﻴﻤﺔ ﻣﺎﺑﻴﻦ ﻭﺑﺎﻟﻨﻬﺎﻳﺔ ﻳﻈﻬﺮ ﺗﻘﺮﻳﺮ ﺣﻴﺚ n ﺗﻤﺜﻞ ﻋﺪﺩ ﺍﻟﺼﻔﺎﺋﺢ ﻟﻜﻞ µL1 ﻓﻲ ﺍﻟﺪﻡ , ﺇﻧﻈﺮﺇﻟﻰ ﺍﻟﺸﻜﻞ ( 4 ) .
ﺷﻜﻞ ﺭﻗﻢ ( 4 ) .
ﻋﻤﻠﻴﺔ ﺣﺴﺎﺏ HCT ﻧﺴﺒﺔ ﻛﺮﻳﺎﺕ ﺍﻟﺪﻡ ﺍﻟﺤﻤﺮﺍﺀ ﻓﻲ ﺍﻟﺪﻡ :
ﻳﺘﻢ ﺣﺴﺎﺑﻪ ﻛﻬﺮﺑﺌﻴﺎ ﺃﻥ ﺃﻋﻠﻰ ﻧﺒﻀﺔ ﻛﻬﺮﺑﺎﺋﻴﺔ ﻧﺎﺗﺠﺔ ﻣﻦ ﻣﺮﻭﺭ ﺧﻠﻴﺔ ﺩﻡ ﺧﻼﻝ ﻓﻮﻫﺔ ﺍﻟﻌﺪ ﻭﺍﻟﺘﻲ ﺗﺘﻨﺎﺳﺐ ﺗﻨﺎﺳﺒﺎ ﻃﺮﺩﻳﺎ ﻣﻊ ﺣﺠﻢ ﺗﻠﻚ ﺍﻟﺨﻠﻴﺔ ﻭﺑﺎﻟﺘﺎﻟﻲ ﻓﺈﻥ ﻣﺠﻤﻮﻉ ﺍﻟﻨﺒﻀﺎﺕ ﺍﻟﻨﺎﺗﺠﺔ ﻳﻤﺜﻞ ﻋﺪﺩ ﺍﻟﺨﻼﻳﺎ ﻓﻲ ﻋﻴﻨﺔ ﺍﻟﺪﻡ ﻭﺑﺎﻟﺘﺎﻟﻲ ﻧﻌﺮﻑ ﻣﻦ ﺧﻼﻟﻬﺎ ﻣﺠﻤﻮﻉ ﺣﺠﻢ ﺧﻼﻳﺎ ﺍﻟﺪﻡ ﺍﻟﺤﻤﺮﺍﺀ ﻓﻲ ﺍﻟﻌﻴﻨﺔ , ﻭﻣﻨﻬﺎ ﻧﺴﺘﻄﻴﻊ ﺣﺴﺎﺏ HCT ﻛﻤﺎ ﻳﻠﻲ :
ﺣﻴﺚ ﺃﻥ :
: V ﺣﺠﻢ ﺧﻼﻳﺎ ﺍﻟﺪﻡ ﺍﻟﺤﻤﺮﺍﺀ .
:Vt ﺣﺠﻢ ﻋﻴﻨﺔ ﺍﻟﺪﻡ .
ﻋﻤﻠﻴﺔ ﺣﺴﺎﺏ ﻧﺴﺒﺔ ﺍﻟﻬﻴﻤﻮﺟﻠﻮﺑﻴﻦ ﻓﻲ ﺍﻟﺪﻡ ( Hgb ) :
ﺑﻌﺪ ﺇﺿﺎﻓﺔ ﺍﻟﻜﺎﺷﻒ ﺍﻟﻤﺤﻞ ﺇﻟﻰ ﻋﻴﻨﺔ ﺍﻟﺪﻡ ﻓﺈﻧﻪ ﻳﺘﻢ ﺗﺤﻠﻞ ﻛﺮﻳﺎﺕ ﺍﻟﺪﻡ ﺍﻟﺤﻤﺮﺍﺀ ﻭ ﻣﺒﻘﻴﺎ ﻋﻠﻰ ﺍﻟﻬﻴﻤﻮﺟﻠﻮﺑﻴﻦ ﻭﻋﻨﺪﻫﺎ ﻳﺘﺤﻮﻝ ﻋﻨﺼﺮ ﺍﻟﺤﺪﻳﺪ ﻓﻲ ﺍﻟﻬﻴﻤﻮﺟﻠﻮﺑﻴﻦ ﻣﻦ ( Ferrous ) ﺇﻟﻰ ( Ferric ) ﻟﻴﻨﺘﺞ ﺳﻴﺎﻧﻴﺪ ﺍﻟﻬﻴﻤﻮﺟﻠﻮﺑﻴﻦ ( HicN ) .
ﻳﺘﻢ ﺗﻌﺮﻳﺾ ﺍﻟﻤﺮﻛﺐ ﻟﺤﺰﻣﺔ ﺿﻮﺋﻴﺔ ﻣﻔﻠﺘﺮﺓ ﺑﻮﺍﺳﻄﺔ ﺯﺟﺎﺝ ﻣﻔﻠﺘﺮ ﺫﺍﺕ ﻃﻮﻝ ﻣﻮﺟﻲ 510nm ﻣﺼﺪﺭﻩ ﻣﺼﺒﺎﺡ ﺗﻨﺠﺴﺘﻮﻥ , ﺛﻢ ﻳﺘﻢ ﺗﺤﻮﻳﻞ ﺍﻟﻀﻮﺀ ﺍﻟﻤﻨﻌﻜﺲ ﻋﻦ ﺳﻴﺎﻧﻴﺪ ﺍﻟﻬﻴﻤﻮﺟﻠﻮﺑﻴﻦ ﺇﻟﻰ ﺇﺷﺎﺭﺓ ﻛﻬﺮﺑﺎﺋﻴﺔ ﺑﻮﺍﺳﻄﺔ ﻣﺎﻳﺴﻤﻰ ( Photo detector ) ﺣﻴﺚ ﺃﻥ ﺍﻹﺷﺎﺭﺓ ﺍﻟﻨﺎﺗﺠﺔ ﺗﺘﻨﺎﺳﺐ ﺗﻨﺎﺳﺐ ﻃﺮﺩﻱ ﻣﻊ ﻛﺜﺎﻓﺔ ﺍﻟﻀﻮﺀ ﺍﻟﻤﻨﻌﻜﺲ ﻓﻲ ﻧﻔﺲ ﺍﻟﻮﻗﺖ ﻳﺘﻢ ﺇﺳﻘﺎﻁ ﺣﺰﻣﺔ ﺿﻮﺋﻴﺔ ﺃﺧﺮﻯ ﻋﻠﻰ ﻣﺎﻳﺴﻤﻰ ( Blank Reagent ) ﻭﺍﻟﺘﻲ ﺗﻌﺘﺒﺮ ﻗﻴﻤﺔ ﻣﺮﺟﻌﻴﺔ ﻟﻘﻴﻤﺔ ﺍﻟﺤﺰﻣﺔ ﺍﻟﻤﻤﺘﺼﺔ ﻣﻦ ﻗﺒﻞ ﺍﻟﻌﻴﻨﺔ ﻭﺍﻟﻠﺘﺎﻥ ﻳﺘﻢ ﻣﻘﺎﺭﻧﺘﻬﻤﺎ ﻋﻦ ﻃﺮﻳﻖ ﺩﺍﺋﺮﺓ ﻣﻘﺎﺭﻥ , ﻭﻓﻖ ﺍﻟﻤﻌﺎﺩﻟﺔ ﺍﻟﺘﺎﻟﻴﺔ :
Sample Absorbance – Blank Absorbance =Hgb Absorbance .
ﺃﻣﺎ ﺍﻟﻮﺣﺪﺓ ﺍﻟﻤﺴﺘﺨﺪﻣﺔ ﻓﻬﻲ g/dL .
ﻣﻼﺣﻈﺔ : ﻛﻞ ﻫﺬﻩ ﺍﻟﻌﻤﻠﻴﺔ ﺗﺘﻢ ﻓﻲ ﺣﺠﺮﺓ ﺗﺴﻤﻰ ( Hgb flow cell )
....
Dr
ع
22:11
علم التحاليل المخبرية
Comments
Post a Comment
اكتب تعليق حول الموضوع